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全光譜流式細胞儀儀器的操作和使用流程

更新時間:2022-02-11      點擊次數(shù):2117
  全光譜流式細胞儀的調試和校準:
  在使用前,甚至在使用過程中都要精心進行調試,以保證工作的可靠性和佳性。調試的項目主要是激光強度、液流速度和測量區(qū)的光路等。
  激光強度:除調整反射鏡的角度以調整到所需波長的激光出光外,還要結合顯示屏上的光譜曲線使激光的強度輸出為大。
  液流速度:可通過操作臺數(shù)字顯示監(jiān)督,調節(jié) 氣體壓力大小以獲得穩(wěn)定的液流速度。
  測量區(qū)光路調節(jié) :這是調試工作的關鍵。需要保證在測量區(qū)的液流、激光束、90散射測量光電系統(tǒng)垂直正交,而且交點較小。一般可在用標準熒光微球等校準中完成。
  流式細胞術中所測得的量是相對值,因此需要在使用前或使用中對系統(tǒng)進行校準或標定,這樣才能通過相對測量獲得的意義。
  因而FCM中的校準具有雙重功能:儀器的準直調整和定量標度。標準樣品應該穩(wěn)定,有形成份形狀應是大小比較一致球形,樣品分散性能良好,且經濟、容易獲得。

  全光譜流式細胞儀儀器的操作和使用流程:
  1、 打開電源,對系統(tǒng)進行預熱;
  2、 打開氣體閾,調節(jié) 壓力,獲得適宜的液流速度;開啟光源冷卻系統(tǒng);
  3、 在樣品管中加入去離子水,沖洗液流的噴嘴系統(tǒng);
  4、 利用校準標準樣品,調整儀器,使在激光功率、光電倍增管電壓、放大器電路增益調定的基礎上,0和90散射的熒光強度強,并要求變異系數(shù)為??;
  5、 選定流速、測量細胞數(shù)、測量參數(shù)等,在同樣的工作條件下測量樣品和對照樣品;同時選擇計算機屏上數(shù)據(jù)的顯示方式,從而能直觀掌握測量進程;
  6、 樣品測量完畢后,再用去離子水沖洗液流系統(tǒng);
  7、 因為實驗數(shù)據(jù)已存入計算機硬盤(有的機器還備有光盤系統(tǒng),存貯量更大),因此可關閉氣體、測量裝置,而單獨使用計算機進行數(shù)據(jù)處理;
  8、將所需結果打印出來。
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